樣品準備

1.取動物全血按常規方法製備血清 ，要求血清清亮 ，無溶血 、無污染 。樣品1周內可於2～8℃保存 ，長期需置-20℃保存 。

2.用樣品稀釋液將待檢血清先按40倍稀釋（如在稀釋板中加入195μL樣品稀釋液再加5μL血清 ，混勻） 。陰 、陽性對照不用稀釋 。

3.濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫使沉澱溶解 ，然後用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋成工作洗滌液(如19份蒸餾水或去離子水+1份濃縮洗滌液) 。

檢驗方法

1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘 ，恢復至室溫 。

2.取所需用量酶標板條 ，設空白對照1孔 、陰性/陽性對照各2孔 ，未用的板條儘快密封 ，2～8℃保存 。

3.空白對照孔加樣品稀釋液100μL；陰 、陽性對照孔分別加入陰 、陽性對照100μL；樣品孔每孔加入樣品稀釋液90μL ，再加入稀釋後的血清10μL 。

註 ：樣本稀釋比例相當於1:200 。

4.混勻 ，蓋好蓋板膜 ，置37℃（推薦水浴）避光反應30分鐘 。

5.甩去孔內液體 ，每孔加350μL工作洗滌液 ，靜置30秒後棄去 ，重複洗滌5次 ，最後用乾淨的吸水紙拍干 。

6.每孔加酶標記物100μL（空白孔除外） 。蓋好蓋板膜 ，置37℃避光反應30分鐘 。

7.洗滌 ，同步驟5 。

8.每孔依次加底物液 、顯色液各50μL ，混勻 ，蓋好蓋板膜 ，置37℃避光反應10分鐘 。

9.每孔加終止液50μL ，混勻 ，於450nm(可用630nm作參比波長）測定各孔吸光值（OD值） ，無參比波長用空白孔調零(即所有孔吸光值減去空白孔吸光值) 。

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