包裝規格
96T×1/盒 、96T×2/盒 、96T×5/盒
原理及用途
本試劑盒由預包被豬瘟病毒重組E2蛋白的酶標板 、酶標記物及其他配套試劑組成 ,應用酶聯免疫法(ELISA)原理檢測豬血清 、血漿樣本中豬瘟病毒抗體 。可用於豬瘟病毒疫苗免疫效果評價及輔助診斷 。
試劑盒的組成
樣品準備
1.取動物全血按常規方法製備血清 ,要求血清清亮 ,無溶血 、無污染 。樣品1周內可於2~8℃保存 ,長期需置-20℃保存 。
2.用樣品稀釋液將待檢血清先按40倍稀釋(如在稀釋板中加入195μL樣品稀釋液再加5μL血清 ,混勻) 。陰 、陽性對照不用稀釋 。
3.濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫使沉澱溶解 ,然後用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋成工作洗滌液(如19份蒸餾水或去離子水+1份濃縮洗滌液) 。
檢驗方法
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘 ,恢復至室溫 。
2.取所需用量酶標板條 ,設空白對照1孔 、陰性/陽性對照各2孔 ,未用的板條儘快密封 ,2~8℃保存 。
3.空白對照孔加樣品稀釋液100μL;陰 、陽性對照孔分別加入陰 、陽性對照100μL;樣品孔每孔加入樣品稀釋液90μL ,再加入稀釋後的血清10μL 。
註 :樣本稀釋比例相當於1:200 。
4.混勻 ,蓋好蓋板膜 ,置37℃(推薦水浴)避光反應30分鐘 。
5.甩去孔內液體 ,每孔加350μL工作洗滌液 ,靜置30秒後棄去 ,重複洗滌5次 ,最後用乾淨的吸水紙拍干 。
6.每孔加酶標記物100μL(空白孔除外) 。蓋好蓋板膜 ,置37℃避光反應30分鐘 。
7.洗滌 ,同步驟5 。
8.每孔依次加底物液 、顯色液各50μL ,混勻 ,蓋好蓋板膜 ,置37℃避光反應10分鐘 。
9.每孔加終止液50μL ,混勻 ,於450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(OD值) ,無參比波長用空白孔調零(即所有孔吸光值減去空白孔吸光值) 。
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